Utilisation des prélèvements de sang séché sur papier buvard pour le diagnostic et le suivi thérapeutique des maladies infectieuses
Résumé
The use of blood collected and dried on filter paper - dried blood spot (DBS) - have started in the middle of the 20th century. DBS sampling can be performed outside care facilities, by capillary puncture, transported in a simple and safe manner by mail, and used with most laboratory methods for antibodies, antigen, or nucleic acids testing. The benefits of this blood collection and transport means explain the growing interest for DBS in the recent years. DBS sampling has shown clinical utility to improve in vitro diagnostics of infectious diseases in hard to reach populations, key populations and people living in low-income countries. DBS can be used at all stages of the therapeutic cascade: screening, confirmation, quantification of nucleic acids, resistance genotyping. Numerous studies dedicated to HIV, viral hepatitis B and C diagnosis using DBS have been reported. The performance of HIV RNA testing on DBS to identified virological failure on therapy is high but not optimal due to the dilution of dried blood in the elution buffer that reduces the analytical sensitivity and due to the contamination by intracellular HIV DNA. Good sensibility and sensitivity have been reported for infant HIV diagnosis and diagnosis of hepatitis B and C using DBS. Variabilities in the pre-analytical steps - including DBS preparation and nucleic acid extraction - limit inter-laboratory comparisons. Too few manufacturers have proposed technical notes for using their assays on DBS and very few assays have pursued regulatory approval for in vitro diagnostic on DBS. Regulatory approvals remain exceptional. Despite these limitations, DBS sampling is a main tool to improve access to infectious disease diagnosis worldwide and is now recommended by international recommendations.
Les débuts de l’emploi du sang collecté et séché sur papier buvard – « dried blood spot » (DBS) – remonte au milieu du XXe siècle. Le prélèvement DBS peut être réalisé en dehors des structures de soins, par ponction capillaire, transporté de manière simple et sûre par voie postale, et utilisé avec la plupart des méthodes de laboratoire pour l’analyse d’anticorps, d’antigène, ou d’acides nucléiques. Ces caractéristiques avantageuses expliquent l’intérêt croissant pour ce mode de prélèvement et de transport du sang. Le prélèvement DBS a montré son utilité clinique pour améliorer le diagnostic in vitro des maladies infectieuses dans les populations d’accès difficiles, les populations clés et chez les personnes vivant dans les pays à faibles ressources économiques. Le DBS est utilisable à toutes les étapes de la cascade thérapeutique : dépistage, confirmation, quantification des acides nucléiques, génotypages de résistances. C’est dans le domaine de la prise en charge du VIH et des hépatites virales B et C que le plus d’études basées sur le DBS ont été réalisées. Les performances des tests ARN VIH sur DBS pour l’identification de l’échec virologique sous traitements sont élevées mais pas optimales, du fait de la dilution du sang séché dans le tampon d’élution qui réduit la sensibilité analytique et de la contamination par l’ADN proviral intracellulaire. Des performances élevées sont rapportées pour le diagnostic VIH pédiatrique et le diagnostic des hépatites B et C. La variabilité des méthodes pré-analytiques – notamment la préparation des DBS et l’extraction des acides nucléiques – limite les possibilités de comparaisons inter-laboratoires. Trop peu de fabricants ont proposé des notices techniques pour l’usage de leurs trousses sur DBS et les approbations réglementaires des tests commercialisés pour l’usage sur DBS demeurent exceptionnelles. Le prélèvement sur DBS malgré ces limites et contraintes est un outil majeur pour améliorer l’accès au diagnostic des maladies infectieuses dans le monde et fait désormais l’objet de recommandations internationales.